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原花青素对乙型肝炎病毒抗原论文与抗体表达的影响

发布日期:1年前 (2018-11-05) / 所属分类:论文网
     

【摘要】  目的 探讨原花青素对乙型肝炎病毒抗原与抗体表达的影响。方法 体外实验:将乙型肝炎病人血清加入不同剂量的葡萄原花青素(gpc),于37 ℃下作用12 h后用elisa法测定乙型肝炎病毒血清标志物(hbvm)的吸光度值。临床试验:选择处于非活动期的慢性乙型肝炎病毒携带者20例,随机分为治疗组和对照组,每组10例。治疗组给予gpc 100 mg/d,对照组不给药,连续4周,在试验前后分别检测乙型肝炎病毒七项指标。结果体外实验:在培养12 h后,各剂量gpc组与对照组相比,各项指标的表达水平差异均无显著性。临床试验:治疗组试验后hbcigm和hbsab的表达水平较对照组升高,而pres1和hbsag则较对照组显著降低(t=2.340~4.885,p<0.05)。结论 gpc可能对乙型肝炎病毒有一定的抑制作用。

【关键词】  花青苷类;乙型肝炎病毒;生物学标记

  the effect of procyanidin on expression of hepatitis b virus antigen and antibody yin lu, wang zheling, zhong jinyi (qingdao university medical college, qingdao 266003, china); [abstract] objective to investigate the effect of grape procyanidin (gpc) on the expression of hepatitis b virus (hbv) antigen and antibody. methods invitro assay: different doses of gpc were added in serum of hb patients and cultured at 37 ℃ for 12 hours. the absorbance of hbv serum marker was then detected by elisa. clinical trial: twenty hbv carriers were enrolled and evenly randomized to treatment and control groups. patients in treatment group were medicated with 100 mg/d, continuous for four weeks; no medication was offered to those in the control. pres1, hbsag, hbsab, hbeag, hbeab and hbcab were detected before and after experiment. results invitro assay showed that no significant differences between the two groups in terms of various indexes of hbv above mentioned of differentdose groups; for clinical trial: the expression levels of hboigm and hbsab were higher than that in the control, and that of pres1 and hbsag were lower (t=2.340-4.885,p<0.05). conclusion gpc might play a certain role in suppressing hepatitis b virus.

  [key words] anthocyanins; hepatitis b virus; biological markers

  目前,全球慢性乙型肝炎病毒(hbv)感染者已多达3.6亿,我国则占1.2亿。原花青素对乙型肝炎病毒抗原论文慢性hbv感染者中的50%~75%有活跃的病毒复制和肝脏炎症改变,但尚未有令人满意的治疗方法。慢性乙型肝炎病人的抗病毒治疗药物也存在疗效低或耐药的问题,目前亟需探索抗hbv治疗的新方法或联合治疗方案[1]。本研究旨在探讨葡萄原花青素(gpc)在体内外对hbv影响。

  1 材料与方法

  1.1 主要材料

  co2恒温培养箱为日本tabaiesoec公司产品;elisa放免试剂盒由北京晶美生物工程有限公司提供;gpc为青岛海隆达生物科技有限公司产品;gpc样品和胶囊为本研究室自制。

  1.2 体外实验

  取11例乙型肝炎病人的血清各50 μl,分别加入终浓度为50、100、200 mg/l的gpc各50 μl,在37 ℃共同培养12 h。对照组不给gpc,只加50 μl生理盐水。各组均采用elisa测定试剂盒分别检测hbv血清标志物(hbvm),操作方法按试剂盒说明书进行。

  1.3 临床试验

  1.3.1 病例选择 根据2000年西安学术原花青素对乙型肝炎病毒抗原论文会议制定的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准,选择处于非活动期的hbv携带者20例,两两匹配后随机分为治疗组和对照组各10例。两组病人年龄、性别、病程、病情严重程度等差异无显著性。参加试验者均知情同意。

  1.3.2 治疗方法及检测指标 治疗组给予gpc胶囊100 mg/d,温开水送服;对照组不给药,连续4周。试验期间两组均正常生活与工作,均不服用其他抗病毒和乙型肝炎治疗药物。两组均于试验开始和试验结束当天清晨采集空腹静脉血5 ml,取血清用elisa法测hbv七项指标:前s1抗原(pres1)、乙型肝炎表面抗原(hbsag)、乙型肝炎表面抗体(hbsab)、乙型肝炎e抗原(hbeag)、乙型肝炎e抗体(hbeab)、乙型肝炎核心抗体(hbcab)及乙型肝炎核心抗体igm(hbcigm)。

  1.4 统计学处理

  采用spss 13.0及ppms 1.5[2]软件进行统计学处理,组间比较采用方差分析、t检验。

  2 结 果

        2.1 体外实验

  体外培养12 h后,各组间各项指标比较差异均无显著性(p<0.05)。见表1。

  2.2 临床试验

  治疗组病人试验后pres1、hbcigm、hbsag、hbsab的表达与对照组相比,差异有显著意义(t=2.340~4.885,p<0.05)。见表2。表1 各组乙型肝炎相关抗原抗体结果比较表2 两组实验前后乙型肝炎各指标检测结果比较

  3 讨 论

  原花青素是植物王国中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称,具有多种生物活性,葡萄、苹果、樱桃等植物中均含有原花青素,其中以葡萄含量最为丰富,尤其是葡萄籽和皮中含量最多。目前研究发现,其具有抗氧化、保护心血管系统、抗肿瘤和抗炎等多方面生物学活性[3]。在观察原花青素对·oh引起的鼠肝线粒体损伤影响的研究中发现,原花青素能有效增加受损伤的线粒体的膜脂流动性,明显减少受损伤的线粒体肿胀及脂质过氧化物的形成,从而维护线粒体结构和功能的完整性[4]。丛红群等[5]研究结果显示,葡多酚可明显抑制n亚硝基化合物诱发大鼠肝细胞p53基因突变率和降低微核率,对n亚硝基化合物的诱变性具有良好的防护作用。另外,原花青素还可能具有一定的抗微生物活性。subathira等[6]研究原花青素对反刍动物瘤胃细菌的影响时也显示,上述细菌对原花青素非常敏感,即使在100 mg/l时也能产原花青素对乙型肝炎病毒抗原论文生抑制作用。nair等[7]研究表明,葡萄籽原花青素能抑制hiv1病毒在外周血单核细胞中的复制和表达,可显著降低趋化受体的表达,并呈剂量依赖性。

  pres1抗原具有吸附于肝细胞受体的表位,其抗原性比hbsag更强,消除该抗原能阻断hbv与肝细胞结合而起到抗病毒作用。hbsag是hbv感染的主要标志,hbsag具有抗原性,可引起机体产生特异保护性的hbsab[8]。hbcigm 的存在常提示病毒处于复制状态。hbcab在血中持续时间较长,为非保护性抗体。hbeag 为hbv复制的重要指标,存在于hbsag阳性者血液中,与 hbv携带者的传染性有关。hbeab对hbv感染有一定保护作用,它的出现是预后良好的征象。

  本研究体外实验结果显示,各组间各指标差异无显著性,提示gpc离开了体内环境在体外无抗hbv活性。而临床试验结果显示,用药后pres1、hbcigm、hbsag以及hbsab的表达与对照组相比差异有显著意义,可能提示gpc具有一定的抑制pres1、hbsag合成或分泌,刺激hbcigm、hbsab产生的作用,在体内具有一定的抗hbv活性,但其确切作用机制尚需进一步研究。

【参考文献】
    [1]杜镭,闫兆平. 慢性乙型肝炎抗病毒治疗进展[j]. 青岛大学医学院学报, 2009, 45(1):8990,93.

  [2]周晓彬,纪新强,徐莉. ppms 1.5统计软件的功能及其应用[j]. 青岛大学医学院学报, 2009,45(1):9193.

  [3]赵艳,吴坤. 原花青素生物学作用研究进展[j]. 中国公共卫生, 2006,22(1):110111.

  [4]陈季武,朱振勤,苏裕,等. 原花青素对·oh致损的鼠肝线粒体的保护作用[j]. 华东师范大学学报:自然科学版, 2004(2): 9296.

  [5]丛红群,成汉义,钟进义. 葡多酚对n亚硝基化合物诱变性的抑制作用[j]. 癌变·畸变·突变, 2004,16(1):3033.[6]subathira s, abdul l m, lucy p m, et al. variation in antimicrobial action of proanthocyanidins from dorycnium rectum against rumen bacteria[j]. phytochemistry, 2004,65(4):24852497.

  [7]nair m p, kandaswami c, mahajaw s, et al. doublebind study on endotelen in chronic venous insuficiency[j]. biol res, 2002,35(34):421431.

  [8]王新,张京秀,倪苑. 药物抑制乙肝病毒血清标志物的实验研究[j]. 天津医药, 2001,29(2):9798.

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